| 1 適用范圍
本標準適用于地面水、地下水及工業(yè)廢水中中基對硫磷、對硫磷、馬拉硫磷、樂果、敵敵畏、敵百蟲的測定。
本方法用三氯甲烷萃取水中上述農(nóng)藥，用帶有火焰光度檢測器的氣相色譜儀測定。在測定敵百蟲時。出于極性大、水溶性強，用三氯甲烷萃取時提取率為零，故采用將敵百蟲轉(zhuǎn)化為敵敵畏后再行測定的間接測定法。
本方法對甲基對硫磷、對硫磷、馬拉硫磷、樂果、敵敵畏、敵百蟲的檢出限為10－9～10－10g，測定下限通常為5×10－4～10－5mg／L。當所用儀器不同時，方法的檢出范圍有所不同。
2 試劑和材料
2.1 載氣和輔助氣體
a.載氣：氮氣，純度99.9％，用裝分子篩凈化管凈化。
b.燃燒氣：氫氣，純度99.9％，用裝分子篩凈化管凈化。
c.助燃氣：空氣，用裝分子篩凈化管凈化。
2.2 配制標準樣品和試樣預(yù)處理時使用的試劑和材料
2.2.1 色譜標準物：甲基對硫磷、對硫磷、馬拉硫磷、樂果、敵敵畏、敵百蟲.純度均為95％～99％。
2.2.2 三氯甲烷（CHCl3）：分析純。
2.2.3 無水硫酸鈉（Na2SO4）沖：分析純。
2.2.4 氫氧化鈉（NaOH）：分析純。
2.2.5 鹽酸（HCl）：分析純，P＝1.19g／mL。
2.3 制備色譜柱時使用的試劑和材料
2.3.1 色譜柱和填充物參考3.4條有關(guān)內(nèi)容。
2.3.2 涂漬固定液所用溶劑：三氯甲烷（2.2.2）。
3 儀器
3.1 儀器型號：配備有火焰光度檢測器的氣相色譜儀。
3.2 記錄器：與儀器相匹配的記錄儀。
3.3 檢測器
3.3.1 類型；火焰光度檢測器。
3.3.2 器件的特性：火焰光度檢測器采用磷濾光片，所用光電倍增管高壓及高阻通常分別為675V和1070。3.4 色譜柱3.4.1 色譜柱類型及特征硬質(zhì)玻璃填充柱，長2m，內(nèi)徑4mm。3.4.2 色譜柱的預(yù)處理
經(jīng)水沖洗后，將玻璃柱管內(nèi)注滿洗液浸泡2h（必要時可將洗液溫熱效果更好），然后用自來水沖洗至中性，蒸餾水沖洗烘干后進行硅烷化處理：將6％～10％的二氯二甲基硅烷－甲醇溶液注滿玻璃柱管浸泡2h，然后用甲醇清洗至中性，烘干備用。
3.4.3 填充物
3.4.4.1 載體
白色酸洗硅烷化硅藻土擔體（0.15～0.20m／m）。
3.4.4.2 固定液
a.名稱及化學性質(zhì)：二甲基硅油（DC-200），聚氟代烷基硅氧烷（QF-1），zui高使用溫度250℃。
b.液相載荷量：DC-200為5％，QF-1為7.5％。
c.涂漬固定液的方法：根據(jù)擔體的重量稱取一定量的固定液。溶在三氯甲烷中，待*溶解后，倒入盛有擔體的燒杯中，再向其中加入三氯甲烷至液面高出1～20m，搖勻后浸2h，然后在通風柜中用紅外燈將溶劑揮發(fā)干（在揮發(fā)時須不斷搖動容器，以使固定液涂漬均勻），再置于120℃烘箱中放置4h后備用。
3.4.4.3 色譜柱的填充方法
將色譜柱的尾端（接檢測器一端）用硅烷化玻璃棉塞住，接真空泵，另一端通過軟管接一漏斗。開動真空泵后將固定相徐徐傾入色譜柱內(nèi)，并輕輕拍打色譜柱，使固定相在色譜柱內(nèi)填充緊密，至固定相不再抽入柱內(nèi)為止，裝填完畢后用硅烷化玻璃棉塞住色譜柱另一端。
3.4.4.4 色譜柱的老化
將填充好的色譜柱裝機通氮氣，以100℃為起點，每2h上升20℃的速度至230℃連續(xù)老化24h。（老化時色譜柱應(yīng)和檢測器斷開，以免污染檢測器）。
3.4.5 柱效能和分離度
總分離效能指標：
對硫磷、馬拉硫磷 K1＝28.08
馬拉硫磷、甲基對硫磷 K2＝10.52
甲基時硫磷、樂果 K3＝28.60
樂果、敵敵畏 K4＝57.75
難分離物質(zhì)對馬拉硫磷、甲基對硫磷的峰高分離度0.9。
3.5 試樣預(yù)處理時使用的儀器
3.5.1 樣品瓶：1L的玻璃磨口瓶。
3.5.2 蒸發(fā)濃縮器：K-D式。
3.5.3 分液漏斗：250mL、500mL。
3.5.4 水浴鍋。
3.5.5 微量注射器：10?L。
3.5.6 繼電器及接點溫度計。
3.5.7 pH計。
4 樣品
4.1 樣品性質(zhì)
水樣，在水中有機磷農(nóng)藥不太穩(wěn)定，易降解。
4.2 水樣采集及貯存方法
用玻璃磨口瓶（3.5.1）采集樣品，在采樣前用水樣將取樣瓶沖洗2～3次。水樣應(yīng)在弱酸性狀態(tài)下保存，因敵敵畏及敵百蟲易降解，應(yīng)盡快分析，其余四種有機磷農(nóng)藥的水樣可在4℃冷藏箱中保存三天。
4.3 試樣的預(yù)處理
4.3.1 甲基對硫磷、對硫磷、馬拉硫磷、樂果、敵敵畏的測定
搖勻樣品并經(jīng)過濾去除機械雜質(zhì)，取試樣100mL（或視水質(zhì)而定）于250mL燒杯中。調(diào)PH至6.5，然后將試樣轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，用三氯甲烷萃取三次。每次三氯甲烷用量5mL（相比為1：20），振搖5min，靜置分層。合并三氯甲烷，收集水層。將合并后的三氯甲烷經(jīng)無水硫酸鈉脫水后。供測定用。無水硫酸鈉脫水柱內(nèi)徑1cm，長15cm，無水硫酸鈉段8cm。
如三氯中烷層中有機磷農(nóng)藥含量太低，在zui小檢出量以下，則需經(jīng)K－D濃縮器濃縮至所需體積后再進行測定。如三氯甲烷層中有機磷農(nóng)藥含量太高，則需少取試樣或試樣經(jīng)稀釋后再進行萃取。
4.3.2 敵百蟲的測定
將4.3.1收集的水層調(diào)pH至9.6后，倒入250mL錐形瓶中，蓋好瓶塞，置于50℃的水浴鍋中進行堿解，不斷搖動錐形瓶。15min后取出錐形瓶，冷至室溫后，調(diào)pH全6.5，將此溶液轉(zhuǎn)移至250mL分液漏斗中，以下操作同4.3.1。
注：在試樣預(yù)處理時，僅用pH計調(diào)節(jié)，不能用pH試紙代替。
5 操作步驟
5.1 儀器的調(diào)整
5.1.1 汽化室溫度；240℃。
5.1.2 柱箱溫度：170℃。
5.1.3 檢測器溫度：230℃。
5.1.4 載氣流速：60mL／min。
5.1.5 氫氣流速：160mL／min。
5.1.6 記錄器紙速：4mm／min。
5.1.7 衰減：根據(jù)樣品中被測組分含量調(diào)節(jié)記錄器的衷減。
5.2 校準
5.2.1 定量方法
外標法。
5.2.2 標準樣品
5.2.2.1 使用次數(shù)：使用標準樣品周期性的重復校準。視儀器的穩(wěn)定性決定周期長短。一般可在測定三個試樣后校準一次。
5.2.2.2 標準樣品的制備
a.儲備溶液：以三氯甲烷（2.2.2）為溶劑，準確稱取一定量的色譜純標準樣品（2.2.1），準確至0.2mg，分別配制濃度為2.5mg／mL的甲基對硫磷、對硫磷、馬拉硫磷儲備溶液；濃度為0.75mg／mL的敵敵畏儲備溶液；濃度為5.0mg／mL的樂果儲備溶液。敵敵畏儲備溶液在4℃可存放兩個月。其余可存放半年。
b.中間溶液的配制：移取一定量的儲備溶液（a），用三氯甲烷做稀釋劑，分別配制成濃度為50µg／mL的甲基對硫磷、對硫磷、馬拉硫磷中間溶液；濃度為7.5µg／mL的敵敵畏中間溶液；濃度為100µg／mL的樂果中間溶液。
c.標準工作溶液的配制：根據(jù)檢測器的靈敏度及所測水佯濃度.分別等體積移取中間溶液（b），于同一容量瓶中，用三氯甲烷做稀釋劑，配制所需濃度的標準工作溶液，在4℃可存放半個月。
5.2.2.3 氣相色譜中使用標準樣品的條件 a.標準樣品進樣體積與試樣進樣體積相同，標準樣品的響應(yīng)值應(yīng)接近試樣的響應(yīng)值； b.調(diào)節(jié)儀器的重復性條件：一個樣品連續(xù)注射進樣兩次，其峰高相對偏差不大于5％，即認為儀器處于穩(wěn)定狀態(tài)； c.標準樣品與試樣盡可能同時進樣分析。5.2.3 校準數(shù)據(jù)的表示試樣中組分按式（1）校準：
式中：Xi——試樣中組分i的含量，mg／L；
Ai——試樣中組分i的峰高，cm；
AE——標準溶液中組分i的峰高，cm；
Ei——標準樣品中組分i的含量，mg／L。
5.3 試驗
5.3.1 進樣
a.進樣方式：注射器進樣。
b.進樣量：一般進樣量5?L，zui大進樣量10?L。
c.操作：用清潔注射器（3.5.5）在待測樣品中抽吸幾次后，抽取所需進樣體積，迅速將注射器中樣品注進色譜儀中，并立即拔出注射器。
5.4 色譜圖的考察
5.4.1 標準色譜圖（見下圖）（略）
5.4.2 定性分析
a.組分的出峰次序：敵敵畏（敵百蟲）、樂果、甲基對硫磷、馬拉硫磷、對硫磷。
b.保留時間：
敵敵畏 1min
樂果 10min
甲基對硫磷 13min 8s
馬拉琉磷 20min
對硫磷 24min15s
5.4.3 定量分析
5.4.3.1 色譜峰的測量
以峰的起點和終點聯(lián)線做為峰底，從峰高極大值對時間軸作垂線，從峰頂至峰底間的線段即為峰高。
5.4.3.2 計算
5.4.3.2.1 甲基對硫磷、對硫磷、馬拉硫磷、樂果、敵敵畏含量的計算：
式中：Ci——試樣中農(nóng)藥含量，mg／L；
Ci標——標樣中農(nóng)藥含量，mg／L；
hi——試樣中農(nóng)藥峰高，cm；
hi標——標樣中農(nóng)藥峰高，cm；
V1——標樣進樣體積，µL；
V2——提取液體積，mL；
V3——試樣進樣體積，µL；
V6——被提取的水樣體積，mL；
K——試樣稀釋因子。
5.4.3.2.2
敵百蟲含量的計算
式中：
C——試樣中敵百蟲含量，mg／L；
C1——試樣中由敵百蟲轉(zhuǎn)化生成的敵敵畏含量，mg／L；
0.86——敵敵畏、敵百蟲分子量之比。
6 結(jié)果的表示
6.1定性結(jié)果
根據(jù)標準色譜圖各組分的保留時間確定被測試樣中的組分數(shù)目及組分名稱。
6.2 定量結(jié)果
6.2.1 含量的表示方法
根據(jù)計算公式計算出出現(xiàn)組分的含量，結(jié)果以兩位有效數(shù)字表示。
6.2.2 精密度及準確度（見表1）
五個實驗室分析含敵敵畏
0.104mg／L、樂果1.38mg／L、甲基對硫磷0.81mg／L、對硫磷1.31mg／L
、乙基硫磷0.77mg／L統(tǒng)一樣品，其重復性相對標準和再現(xiàn)性相對標準偏差分別列于表1。
表1 精密度及準確度 | 農(nóng)藥 | 樣品濃度 mg／L | 精密度 | 準確度 | | 重復性 | 再現(xiàn)性 | 加標回收宰 ％ | | 標準偏差 | 相對標準偏差 ％ | 標準偏差 | 相對標準偏差 ％ | | 敵敵畏 樂 果 甲基對硫磷 馬拉硫磷 對硫磷 敵百蟲 | 0.1 1.29 0.78 1.21 0.77 | 0.18 0.60 0.50 0.48 0.42 | 4.8 4.3 3.2 4.3 3.8 | 0.22 0.82 1.22 0.76 0.51 | 5.4 2.7 3.4 5.2 1.1 | 101.3 92.2 99.0 97.2 99.8 98.1 | 儀器靈敏度調(diào)至zui高時，產(chǎn)生色譜峰高于2倍噪音時的進樣量作為儀器的檢出限。
表2 檢出限及測定下限 | 數(shù)量 農(nóng)藥 | 檢出限 g | 測定下限 mg／L | | 敵敵畏 敵百蟲 樂果 甲基對硫磷 馬拉硫磷 對硫磷 | 4.0×10－10 3.4×10－10 3.8×10－9 2.8×10－9 4.3×10－9 3.6×10－9 | 6.0×10－5 5.1×10－5 5.7×10－4 4.2×10－4 6.4×10－4 5.4×10－4 | | 
